КАТЕГОРИИ: Архитектура-(3434)Астрономия-(809)Биология-(7483)Биотехнологии-(1457)Военное дело-(14632)Высокие технологии-(1363)География-(913)Геология-(1438)Государство-(451)Демография-(1065)Дом-(47672)Журналистика и СМИ-(912)Изобретательство-(14524)Иностранные языки-(4268)Информатика-(17799)Искусство-(1338)История-(13644)Компьютеры-(11121)Косметика-(55)Кулинария-(373)Культура-(8427)Лингвистика-(374)Литература-(1642)Маркетинг-(23702)Математика-(16968)Машиностроение-(1700)Медицина-(12668)Менеджмент-(24684)Механика-(15423)Науковедение-(506)Образование-(11852)Охрана труда-(3308)Педагогика-(5571)Полиграфия-(1312)Политика-(7869)Право-(5454)Приборостроение-(1369)Программирование-(2801)Производство-(97182)Промышленность-(8706)Психология-(18388)Религия-(3217)Связь-(10668)Сельское хозяйство-(299)Социология-(6455)Спорт-(42831)Строительство-(4793)Торговля-(5050)Транспорт-(2929)Туризм-(1568)Физика-(3942)Философия-(17015)Финансы-(26596)Химия-(22929)Экология-(12095)Экономика-(9961)Электроника-(8441)Электротехника-(4623)Энергетика-(12629)Юриспруденция-(1492)Ядерная техника-(1748) |
Методические рекомендации по подготовке к занятию. Тема 4 Клеточные включения
Тема 4 Клеточные включения. Нуклеиновые кислоты. Ферменты Цель: - ознакомить с клеточными включениями, нуклеиновыми кислотами и ферментами План: 1 Расмотреть под микроскопомпрепарат печени хвостатых амфибий 2 Расмотреть и зарисовать клеточные включения, клеточные границы, клеточные ядра Чтобы сохранить жир на срезах, полученных от залитых в целлоидин или парафин объектов, необходимо применить фиксатор, в состав которого входит осмиевая кислота, фиксирующая жир и переводящая его в нерастворимое для последующих реактивов состояние; в то же время она окрашивает жир в черный цвет. После осмиевых фиксаторов обычная окраска ядер гематоксилином не удается, поэтому в качестве ядерного красителя применен сафранин, окрашивающий ядра в красный цвет. Снова под микроскопом знакомый объект — печень хвостатых амфибий, но на этот раз препарат обработан специальным образом для сохранения жировых включений в печеночных клетках. Рассматривая препарат при слабом увеличении, легко заметить в печеночных клетках черные шарики, представляющие собой окрашенные осмием липидные включения. Нужно выбрать место, где включения видны вполне отчетливо, хорошо заметны клеточные границы и окрасились клеточные ядра; рассмотреть и зарисовать препарат следует при сильном увеличении. Клеточные границы при примененной здесь фиксации не так заметны, как на препаратах или но все же видны достаточно ясно. Ядра печеночных клеток — гепатоцитов как обычно, круглые, окрашены сафранином в красный цвет и, как это типично для осмированных препаратов, имеют более гомогенный вид, чем при других фиксациях; только местами в них заметны крупные хроматиновые глыбки.
Цитоплазма гепатоцитов окрашена в бледный желтовато-зеленый цвет. В цитоплазме видны липидные включения в виде шариков различной величины, разбросанных по всей клетке и окрашенных в темный (от бурого до черного) цвет. Между печеночными клетками видны пигментные клетки. Рибонуклеиновая кислота (РНК) в клетках печени лягушки Фиксация смесью Карнуа; окраска: метиловый зеленый и пиронин Здесь перед нами тот же объект, как и на препарате, но при другой фиксации и окраске, которые позволяют выделить как структуры, содержащие ДНК, так и части клеток, содержащие РНК- Элементы, содержащие ДНК, окрашиваются в синевато-зеленый цвет метиловым зеленым, а части клетки, содержащие РНК, окрашиваются в красный цвет пиронином. Изучить и зарисовать препарат следует при сильном увеличении. Цитоплазма окрашена в красный цвет; ее неравномерная окраска указывает, что РНК больше в различных зернистых образованиях цитоплазмы. В круглых ядрах выделяются синевато-зеленые глыбки хроматина и хорошо заметно ядрышко, окрашенное в красный цвет. Эта окраска показывает, что РНК имеется не только в цитоплазме, но и в ядрышках. Проверкой заключения в местонахождении РНК в клетке служит метод Браше; срезы до окраски подвергают действию рибонуклеазы— фермента, разрущающего РНК. Если способные окрашиваться в красный цвет части клетки перестают окрашиваться после действия рибонуклеазы, это служит подтверждением наличия в таких структурах РНК.
Дата добавления: 2014-11-29; Просмотров: 415; Нарушение авторских прав?; Мы поможем в написании вашей работы! Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет |